Fluoreszenzfarbstoffe zur Vitalittsbestimmung von Mikroorganismen

Diplomarbeit aus dem Jahr 1996 im Fachbereich Medizin - Biomedizinische Technik, Note: 1,0, Rheinisch-Westflische Technische Hochschule Aachen (Unbekannt), Sprache: Deutsch, Abstract: Inhaltsangabe:Zusammenfassung:
Im Laufe dieser Arbeit wurden aktive und durch Nhrstoffmangel inaktivierte Zellen von Pseudomonas fluorescens in Chemostaten bzw. Schttelkolben kultiviert. An diesen Bakterienzellen wurden verschiedene Fluoreszenzfarbstoffe auf ihre Eignung als Indikatoren zur Vitalittsbestimmung untersucht.
Die Experimente mit den verschiedenen Fluoreszenzfarbstoffen fhrten zu den folgenden Ergebnissen.
Der AT-spezifische Nucleinsure-Farbstoff DAPI erwies sich bei einer Konzentration von 20 g/ml als ein zuverlssiger Nachweis fr die Erfassung der Gesamtzellzahl. DAPI ist zudem ein sensibler Indikator fr die Zellaktivitt und ermglicht przise Aussagen ber die Zusammensetzung einer Bakterienpopulation in Hinblick auf ihre Vitalitt. Im Verlauf der Reaktivierungsversuche teilte sich die Gesamtpopulation aller DAPI-gefrbten Zellen in eine DAPIintensiv- und eine DAPIschwach-gefrbte Teilpopulation, die aktive bzw. inaktive Zellen reprsentieren. Eine Aufteilung mit annhernd gleichen Verhltnissen konnte bei der Untersuchungen der Zellvolumina ermittelt werden. Eine Anfrbung der Zellen durch die Umsetzung des Dehydrogenase-Substratanalogons CTC (1,52 mg/ml) zu seinem konjugierten, fluoreszierenden Formazan ergnzte die DAPI-Frbung und untermauerte ihre Ergebnisse, da das Formazan die Mikroorganismen anzeigt, die ber respiratorische Aktivitt verfgen.
Auch die Verwendung von 10 g/ml des Nucleinsure-Farbstoffes Hoechst 33342 erbrachte bei der Gesamtzellzahlerfassung konsistente und reproduzierbare Ergebnisse, zeigte jedoch im Verlauf von Reaktivierungsversuchen keine signifikanten Unterschiede im Bezug auf die Zellaktivitt.
Acridinorange (800 g/ml), ein unspezifischer Nucleinsure-Farbstoff mit einem konzentrationsabhngigen rot-grn-Metachroismus, eignet s