Mutationsanalyse und Grundlagen fur funktionale Untersuchungen zu den positionalen Kandidatengenen fur katatone Schizophrenie, EIF2AK4 und SLC12A6, aus der chromosomalen Region 15q14-15

Inhaltsangabe:Zusammenfassung:
In dieser Arbeit wurden einige molekularbiologische Anstze zur Untersuchung des genetischen Einflusses auf periodische Katatonie, einem Subtyp der schizophrenen Erkrankungen, vorgestellt. Fr EIF2AK4, eines der beiden hier behandelten Kandidatengene fr Chromosom 15-bezogene Schizophrenie (SCZD10), wurde eine Mutationsanalyse durch Sequenzierung der Promotorregion sowie aller Exons dreier erkrankter Individuen und von zwei Kontrollpersonen durchgefhrt. Dabei konnten keine Varianten nachgewiesen werden, welche sich auf das Patientensample beschrnkten.
Ein im Vorfeld dokumentierter codierender SNP in Exon 28 schien aber in einer der untersuchten Familien mit der Krankheit zu kosegregieren. Daher wurde im Rahmen einer Assoziationsstudie durch RFLP Analyse einer groen Stichprobe geprft, ob eine der beiden Varianten signifikant hufiger in Patienten als in gesunden Individuen auftritt.
Die Untersuchung ergab eine gleichmige Verteilung der Varianten in Patienten- und Kontroll-Sample in perfektem Hardy-Weinberg Equilibrium, so dass eine Assoziation mit der Erkrankung ausgeschlossen werden konnte. In der Promotorregion bzw. 5UTR von SLC12A6, dem zweiten der untersuchten Kandidatengene, konnten in der Vergangenheit zwei kosegregierende A => G Varianten nachgewiesen werden, welche signifikant mit Schizophrenie und bipolaren Psychosen assoziiert sind. Es soll nun anhand eines Luciferase-Assays getestet werden, ob diese Varianten die Aktivitt des Promotors verndern. In dieser Arbeit wurden die Vorbereitungen zur Durchfhrung des funktionalen Assays getroffen. Im Rahmen dieses Projektes wurde unter anderem das Exon1A von SLC12A6 aus drei verschiedenen Zelllinien auf Splei -sites berprft.
Unsere Ergebnisse zeigten, dass in einer lymphoblastoiden Zelllinie sowie in SK-N-SH, einer neuroblastoiden Zelllinie, das Exon 1A nicht gespleit wird. Dieses Ergebnis ist kohrent mit dem aktuellen Befund der UCSC April 2003 freeze release des